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血清尿素測定的方法有什么

血清尿素測定的方法有二乙酰一肟法、脲酶-波氏比色法、酶偶聯速率法等。

1、二乙酰一肟法:

二乙酰在強酸條件下與尿素縮合成紅色的4,5-二甲基-2-氧咪唑化合物,顏色深淺與尿素含量成正比。因二乙酰不穩定,故由試劑中二乙酰一肟與強酸作用產生二乙酰。

2、脲酶-波氏比色法:

脲酶水解尿素產生2分子氨和1分子二氧化碳,氨在堿性介質中與苯酚及次氯酸鈉反應,生成藍色的吲引哚酚陰離子,此過程需用亞硝基鐵氰化鈉催化反應。藍色吲哚酚的生成量與尿素含量成正比,在630m波長處有吸收峰。

3、酶偶聯速率法:

尿素經脲酶催化水解生成2分子氨及1分子二氧化碳,在谷氨酸脫氫酶催化下,氨與α-酮戊二酸還原型輔酶Ⅰ作用生成谷氨酸與氧化型輔酶Ⅰ。還原型輔酶Ⅰ在340m波長處有吸收峰,其吸光度下降的速率與待測樣品中尿素的含量成正比。

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