發(fā)布時(shí)間:2025/07/30 來源:海外試管助孕機(jī)構(gòu)
試管嬰兒胚胎培養(yǎng)是一個(gè)嚴(yán)謹(jǐn)且精細(xì)的過程,每一個(gè)環(huán)節(jié)都關(guān)乎著新生命的孕育與誕生。
首先是刺激排卵階段,這一過程猶如為生命之花精心培育沃土。醫(yī)生會根據(jù)女性的年齡、激素水平和卵巢儲備功能,借助抗苗勒管激素(AMH)檢測、竇卵泡計(jì)數(shù)(AFC)等評估手段,制定個(gè)性化的促排卵方案。臨床上常用的促排卵藥物組合包括促性腺激素釋放激素類似物(GnRHa)和促性腺激素(Gn),前者通過調(diào)節(jié)下丘腦 - 垂體 - 卵巢軸,避免過早出現(xiàn)內(nèi)源性黃體生成素(LH)峰,后者則直接作用于卵巢,促使原本在自然周期中可能閉鎖凋亡的卵泡重新發(fā)育。這種干預(yù)能夠讓女性在一個(gè)周期內(nèi)排出 8 - 15 枚卵子,相較于自然周期 1 枚的排卵量,顯著提升了受孕機(jī)會。
在促排卵過程中,醫(yī)生會構(gòu)建嚴(yán)密的監(jiān)測體系:從月經(jīng)周期第 2 - 3 天開始,每 2 - 3 天進(jìn)行一次經(jīng)陰道超聲檢查,動態(tài)監(jiān)測卵泡的大小、形態(tài)及數(shù)量變化;同時(shí),同步檢測血清雌二醇(E2)、孕酮(P)等激素水平,依據(jù)卵泡生長曲線和激素反饋,實(shí)時(shí)調(diào)整 Gn 用藥劑量。值得注意的是,部分患者可能出現(xiàn)卵巢過度刺激綜合征(OHSS),這要求醫(yī)生在追求卵子數(shù)量的同時(shí),精準(zhǔn)把控用藥強(qiáng)度,確保卵泡能夠健康、同步地生長。
當(dāng)主導(dǎo)卵泡直徑達(dá)到 18 - 20mm,且血清 E2 水平與卵泡數(shù)量呈現(xiàn)合理比例時(shí),便意味著卵泡發(fā)育成熟,隨即進(jìn)入取卵環(huán)節(jié)。在超聲引導(dǎo)下,醫(yī)生使用外徑僅 1.2mm 的特制穿刺針,經(jīng)陰道穹窿穿刺進(jìn)入卵巢。這一操作不僅要求醫(yī)生具備精湛的空間定位技術(shù),還需在 3 - 5 分鐘內(nèi)完成單卵泡穿刺,以減少卵子在體外暴露的時(shí)間。取出的卵子會迅速被送往配備百級層流凈化系統(tǒng)的胚胎實(shí)驗(yàn)室,在 37℃、5% 二氧化碳、6% 氧氣的恒溫、恒濕、無菌環(huán)境中,胚胎學(xué)家使用倒置顯微鏡,通過觀察卵冠丘復(fù)合物(OCCC)的形態(tài),以及第一極體的排出情況,挑選出處于減數(shù)第二次分裂中期(MII 期)的健康卵子。對于存在盆腔粘連、多囊卵巢綜合征等特殊情況的患者,還需采用改良的穿刺路徑或多卵泡同步穿刺技術(shù),以提高取卵成功率。
與此同時(shí),男性需在取卵當(dāng)日,通過手淫法或經(jīng)皮附睪 / 睪丸穿刺取精術(shù)(PESA/TESA)提供他的精子樣本。樣本采集后,實(shí)驗(yàn)室人員會采用密度梯度離心法(常用 40%/80% 雙層梯度)或上游法進(jìn)行處理。密度梯度離心法利用不同細(xì)胞成分的比重差異,在離心機(jī)的作用下將精子與雜質(zhì)分層;上游法則是利用活動精子的主動運(yùn)動能力,使其游向培養(yǎng)液上層。通過這些技術(shù),能夠有效去除精液中的不活動精子、白細(xì)胞、雜質(zhì)以及精漿中的抑制受精物質(zhì),從而獲得前向運(yùn)動精子比例超過 60%、形態(tài)正常率≥4% 的優(yōu)質(zhì)精子。對于極重度少弱精患者,還會采用微滴法或高滲處理等輔助技術(shù),進(jìn)一步篩選具有受精能力的精子。
隨后進(jìn)入至關(guān)重要的受精環(huán)節(jié),目前主要有兩種受精方式。常規(guī)受精(IVF)是將處理后的精子與卵子按照 5000 - 20000:1 的精卵比,放置在含有氨基酸、丙酮酸、乳酸等營養(yǎng)成分的特殊受精培養(yǎng)液中。這種培養(yǎng)液的滲透壓控制在 280 - 295mOsm/kg,pH 值維持在 7.2 - 7.4,模擬了體內(nèi)輸卵管的微環(huán)境,依靠精子自身的頂體反應(yīng)和透明帶結(jié)合能力,游向卵子并完成受精。受精后 16 - 18 小時(shí),胚胎學(xué)家會通過觀察原核(PN)形態(tài),判斷受精是否正常。
而卵胞漿內(nèi)單精子顯微注射技術(shù)(ICSI)則適用于嚴(yán)重少弱畸精癥(精子濃度<5×10?/mL、前向運(yùn)動精子<10%)、梗阻性無精癥,或是存在卵子透明帶異常、既往常規(guī)受精失敗等情況。該技術(shù)需借助顯微操作儀,在 400 倍放大視野下,使用內(nèi)徑 5 - 7μm 的注射針,挑選頭部形態(tài)規(guī)則、頸部無腫脹、尾部無卷曲的精子,通過破膜、吸核、注射三個(gè)步驟,將單個(gè)精子直接注入成熟卵母細(xì)胞的胞漿內(nèi)。為提高 ICSI 受精成功率,實(shí)驗(yàn)室會采用 Piezo 脈沖式顯微操作系統(tǒng),減少對卵母細(xì)胞的機(jī)械損傷;同時(shí),對精子進(jìn)行低滲腫脹試驗(yàn)(HOS),篩選出細(xì)胞膜功能完整的精子。
受精完成后,胚胎便開啟了在體外培養(yǎng)箱中的奇妙成長之旅。胚胎被放置在含有人類血清白蛋白(HSA)或合成血清替代物(SSS)的序貫培養(yǎng)液中,這種培養(yǎng)液包含基礎(chǔ)鹽類、維生素、氨基酸等 60 余種成分,并根據(jù)胚胎發(fā)育階段分為卵裂期培養(yǎng)液和囊胚期培養(yǎng)液。培養(yǎng)箱采用三氣(5% 二氧化碳、6% 氧氣、89% 氮?dú)猓┗旌舷到y(tǒng),配合紅外二氧化碳傳感器和濕度傳感器,能夠?qū)囟染_控制在 37.0±0.1℃,pH 值維持在 7.2 - 7.4,濕度保持在 95% 以上,最大程度模擬女性子宮內(nèi)的溫度、酸堿度和氣體環(huán)境。
在接下來的 2 - 6 天里,胚胎經(jīng)歷多次細(xì)胞分裂:受精后 24 - 30 小時(shí)形成 2 - 細(xì)胞胚胎,40 - 44 小時(shí)發(fā)育為 4 - 細(xì)胞胚胎,56 - 60 小時(shí)成為 8 - 細(xì)胞胚胎。此時(shí),胚胎學(xué)家會根據(jù)卵裂球的均一度、碎片率、多核情況進(jìn)行評分。到第 3 天,胚胎發(fā)育到桑椹胚階段,細(xì)胞數(shù)目達(dá)到 16 - 32 個(gè);繼續(xù)培養(yǎng)至第 5 - 6 天,形成具有內(nèi)細(xì)胞團(tuán)和滋養(yǎng)層細(xì)胞的囊胚。內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將發(fā)育成胎兒的各種組織器官,滋養(yǎng)層細(xì)胞則會形成胎盤和胎膜。在此期間,胚胎學(xué)家每天都會使用時(shí)差成像系統(tǒng)(Time - Lapse)進(jìn)行非侵入性觀察,記錄胚胎的發(fā)育速度、細(xì)胞形態(tài)、碎片動態(tài)變化等 40 余項(xiàng)參數(shù),通過 AI 算法建立胚胎發(fā)育模型,精準(zhǔn)評估胚胎的發(fā)育潛力。
最后,醫(yī)生會根據(jù)女性的年齡、子宮內(nèi)膜厚度(理想厚度 8 - 12mm)、既往妊娠史以及胚胎的發(fā)育情況,使用柔軟的胚胎移植導(dǎo)管,在超聲造影劑的輔助下,經(jīng)宮頸緩慢移植到女性子宮內(nèi)最適宜著床的位置 —— 通常選擇距離宮底 1.5 - 2.0cm 的宮腔中段。為提高著床率,部分患者會采用 “內(nèi)膜準(zhǔn)備方案”,通過口服雌激素、注射黃體酮等方式,將子宮內(nèi)膜調(diào)整至 “種植窗” 狀態(tài)。整個(gè)胚胎培養(yǎng)與移植過程,每一步操作都需要胚胎學(xué)家和臨床醫(yī)生具備高度的專業(yè)素養(yǎng)與精準(zhǔn)操作能力,稍有不慎就可能影響胚胎的質(zhì)量和妊娠結(jié)局,只有各環(huán)節(jié)緊密配合、嚴(yán)格把控,才能為新生命的誕生奠定堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。
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